———我国首例白血病病毒分离和研究侧记
上海医学院 程 立
１９５４年，卫生部决定在我国医学院校内普遍设立病理生理学教研室。于是，上医于１９５５年成立了病理生理学教研室，著名血液学家朱益栋教授为主任。这年２月，我被选送到北京由原苏联专家授课的 “中国首届病理生理学高级师资进修班 ”学习，一年后结业，由原生理教研室调入该室任职。由于这是一门新设立的医学基础学科，头几年教师们主要精力用于编写教材和教学实验指导，上理论课和带同学实验等教学工作，科研工作也逐渐开展。
白血病是我国人类常见的九大恶性肿瘤之一，年发病率为２。７６ /１０万人。但其病因、发病机理尚不完全清楚。通过对与人类白血病类似的小鼠白血病模型的实验，发现化学、物理和生物性致瘤因素均可诱发不同类型白血病，尤其以病毒病因最为明显。研究证明，逆转录病毒与动物和人类的白血病发生有关。因此，病毒已成为白血病病因和发病机理的研究热点之一。
上世纪６０年代初，在朱益栋教授指导和支持下，我组织和领导了一个科研小组，选定当时国内还处于空白的白血病病毒病因学，集中精力进行实验研究。为此，我们研究小组不少人员几乎奋斗了一生，为我国首例白血病病毒的分离作出了贡献。
１９６５年我们成功地诱发L６５６５病毒性淋巴细胞白血病的小鼠模型，可连续传代。１９７１年又在该小鼠模型基础上，建成了 SRS腹水型淋巴瘤小鼠瘤株，也可连续移植。这两个模型的瘤细胞证实均含有白血病病毒，命名为 SRS病毒（SRSV），皮下或腹腔注射皆可诱发不同白血病。为了对白血病病毒进行深入的研究，需要分离出大量纯化的病毒，于是，我们在已建立的L６５６５和 SRS两个模型的基础上，逐步转入细胞生物学和病毒学研究。１９８２年始，我们陆续建成了 SRS８２细胞系、SACIB２克隆细胞株、SRSV/３T３细胞系。后一株细胞系是我们建成的 SRSV和 NIH/３T３细胞共同培养建成的，而 NIH/３T３细胞是国际学术界常用的非肿瘤性成纤维细胞，具有生长旺盛、较易获得纯化的病毒，也为白血病病毒分子生物学研究提供了良好条件。１９９７年我们又建成了L６５６５白血病淋巴细胞克隆株。这些细胞株已送中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库长久保存，以便提供兄弟单位研究应用，充分发挥我们研究小组成果的社会效益。
研究小组在白血病整体和细胞生物学的研究过程中，都与学校生物物理教研室蒋有铭、郑葆芬、程关荣、曹式芳、单易非等教授紧密合作，把研究深入到分子生物学水平，证实我们分离的 SRSV与 RNA肿瘤病毒有关。此外，应用核酸提取、凝胶电泳、重组分子克隆等分子生物学技术，证明与国际常用的 AKR和 MO小鼠白血病病毒不同，表明 SRSV是我国首次分离的新白血病病毒株。之后，我们与美国加利福尼亚大学分子生物学教研室 （H。Fan）教授协作，还证实了 SRS病毒是一种复合体，有别于西方国家已分离的白血病病毒株，并将此研究结果共同发表于美国１９９５年的。Virology。（病毒学）杂志。４０多年来，我们研究小组坚持对白血病病毒研究，从整体水平小鼠病毒性白血病模型建立，到细胞水平的小鼠病毒性白血病细胞系和细胞克隆株建立，并深入到分子水平的小鼠白血病病毒的系列研究，终于分离研究出我国首例具有自身特点的白血病新病毒株，为人类攻克白血病作出应有的贡献。
今年我已是８０高龄，离休已１４年了。这４０多年来与实验性白血病病毒病因学研究结下的情缘，常成为我最美好的回忆。自上世纪６０年代开始，我就一直与季文琴、孔宪寿、殷莲华、黄春妹、朱根发等同仁和技术人员共同奋战。这是一个非常团结协作的科研集体， 大家始终坚持白血病病毒的研究方向，从不朝思暮想，即便在 “文革 ”内乱期间，大家也都克服种种困难而坚持了下来。我们研究对象是患有白血病或淋巴瘤的活的小鼠，不仅饲养管理要求高，而且每天对患鼠都要认真观察，对每代白血病传递过程都要详细记录 ；一套科学的工作程序，培养和锻炼了小组人员的严谨工作态度。那时对我们小组的科研工作也有非言，认为这种实验性白血病病毒研究，纯属基础理论性研究，没有什么实用价值，应予停顿。我们在据理力争、排除干扰的同时，还不辞辛苦、轮流到动物房去值班，坚守在白血病小鼠的传代保种的工作岗位上。回顾这段经历，大家尚心有余悸，我们如果稍有动摇，就不能保牢白血病小鼠的传代保种了，也就谈不上以后白血病小鼠的细胞株和病毒学的深入研究，也就没有我国首例分离研究出的白血病新病毒株了。此外，白血病病毒学研究的进展和深入，还与本校生物物理教研室长期友好协作有关，在几十年中，科研彼此支持，经常商讨交流，共同发表论文和获奖，不断地把白血病病毒分子生物学研究推向前进。在研究过程中，我们曾先后发表中英文论文近百篇，还两次参加国际性学术交流会，培养硕士、博士研究生２０余人，并获得国家教委和卫生部科技进步奖７项，主编出版的。病毒肿瘤学。专著，获卫生部科技进步三等奖。这些科研成果的获得，反映了我们小组人员对科研的执著精神，这也是上医人的传统。
在我们取得成果之时，我常想起我们敬爱的老主任朱益栋教授。他是我国著名的血液病专家，上世纪４０年代在美国留学时，就对白血病细胞培养和化学治疗作用进行过研究。他不仅支持我开展实验性白血病研究工作，而且在研究方向、切入点和技术路线上都给以具体指导，甚至亲自参加实际工作。我还清楚记得在 “文革 ”期间，他也和我们一起轮流到动物房值班，还抓紧时间将L６５６５白血病小鼠研究积累的上百张血液涂片，在显微镜下仔细观察，进行诊断和分类。迄今，这份详细的科研资料仍保存在档案里。还有一位学校领导也使我久久不能忘怀，那就是当时主管学校科研的副院长、著名外科专家沈克非教授。记得那是１９６５年底，我们在向他汇报我们建成L６５６５白血病病毒小鼠模型研究时，他就明确提出要我们尽快做好总结，及时发表研究成果，以获得国内公开发表的第一个病毒性白血病模型的创新权。这种敏锐的创新成果保护意识，为我们科研成果公开发表在时间上赢得了优势，进一步鼓舞着我们深入开展白血病病毒学研究。
白血病病毒病因、发病机理研究是我一生的追求，在研究小组同志们的共同努力下，在老主任朱益栋教授和院领导沈克非的支持和指导下，使我平凡的一生有了美好的回忆。