《最后的晚餐》是基督教传说中最重要的故事，几乎被所有宗教画家描绘过。幸运的是，达 ·芬奇对人的形象和心理作过深入的观察和研究，所以，《最后的晚餐》首开先河，从人物的动作、姿态、表情着手，表现人物微妙的心理活动并取得成功。
这幅画跟其他宗教题材的作品有所不同的是，图中门徒头上没有圣光，连耶稣头上也没有。这表明达 ·芬奇想强调的是，他们都是现实生活中普普通通的人。他只用透视法，让耶稣成为中心，以窗口射过来的光替代了圣光，并让犹大置身于黑暗中。
这幅作品的奇妙之处还表现在对基督背后的窗的处理上。画家在墙壁上创造了一个平衡框架，从这里能看到窗子上方隐约的山花，同时，画家运用晕涂法，使这种平衡感变得非常柔和。达 ·芬奇对餐厅空间的处理技巧，体现了人类杰出的创造力。