《哀悼基督》是画家在1305~1308年为意大利帕多瓦的阿里纳教堂所作的装饰壁画之一。在这幅画上，拜占庭绘画风格所拥有的那种平面而抽象化的感觉消失了。人物不再古板地对称排列，而是以左下角的基督与圣母为核心，铺开了一个能够细腻地表现人物心灵与情感的动人场景。位于构图中心位置的圣约翰，在绝望与万分悲痛中向后伸展双臂，完美地展现了被荒弃了近千年的透视法。尽管当时的乔托并不十分了解解剖与透视法则，但通过透视手法的表现，画面中的人物变得饱满起来，形体浑圆，而明暗相接的部位，也过渡得更加自然、柔和。
《哀悼基督》描写的是《新约》故事中一个最为悲哀的时刻。耶稣受刑后，苍白、僵硬的尸体被从十字架上取下，头、手与双脚都需要由人托起。圣母紧紧地将耶稣搂在怀里，母亲失去爱子的悲哀神情、紧绷的双臂同耶稣冰冷的尸体形成了鲜明的对比。其他人看着耶稣的尸体，也都难以抑制内心的情感，或失声痛哭，或默默无语。近处的两位女子虽然背朝我们，并且被长袍裹得严严实实，但观者同样可以感觉到她们悲痛的心情。远角的一棵枯树更加重了死亡的悲凉气息。阴霾的天空中，赶来一群加入哀悼行列的天使，他们痛苦的表情愈发令人撕心裂肺。画家所描绘的不再仅仅是一个故事，而使我们仿佛看到了整个基督受难的真实场景。
因为绘画的巨大成功，乔托逐渐从一个穷苦的放羊娃变成了富翁，社会地位也逐渐提高。他与罗马主教熟识，与那不勒斯国王是至交，佛罗伦萨城甚至授予他最高画师的称号，还把城市的重要建筑与公共艺术全部委托给他去设计。艺术家从此开始享有独立地位，而艺术终于完全冲破了僵硬形体的桎梏，再次回归到古希腊、罗马极具生命力的艺术传统中去。